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Index>Q&A> 採樣方式


candy_blue.gif 成蝦的哪一個器官是診斷WSSV最好的採樣部位?

白點病毒可存在於許多蝦的組織中,當選擇採樣的目標組織時,要考慮三個因 素:1.含有較多的病毒,2.容易採樣,3.對蝦的傷害較小;因此選出腹() 足、鰓、蝦血與胸足作為診斷的採樣目標。基本上因為腹足容易剪得且含有 較少的PCR抑制物,因此最常被選用。鰓是其次被推薦的病毒診斷採樣目標,因為對蝦比較不會造成太大的傷害,且可用來偵測許多其他病毒,如:IHHNVYHV/GAVTSV等。

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candy_blue.gif 何時是種蝦最好的診斷時期?

PCR檢測種蝦最好的時機是在首次產卵後。首先,在產卵後檢測可以節省診斷費用,無法產卵的種蝦當然沒有檢測的必要,而產卵失敗的種蝦,多半已屬於嚴重感染。

其次,根據研究發現PCR陰性的卵與產卵後仍為PCR陰性的種蝦之間有相當高的關聯性,如果只選擇產卵後仍為PCR陰性的種蝦所產的卵,將能降低引入白點症病毒到種苗場的風險。已知一些造成壓力的因素如:天氣的改變、不良的水質,都能誘發白點症病毒的自我複製,而產卵對種蝦而言也是一種很大的壓力。如果種蝦在產卵後仍為PCR陰性,幾可確定這隻種蝦不帶有白點症病毒。

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candy_blue.gif 必須採集多少隻LPs才會達到足夠的信賴區間(confidence level)?

150隻是大多數研究者所認同的數目。如果要在非常大(如:個體數超過150,000)的母群體中確認是否有被感染的個體,並且到達95%的信賴區間,在統計學上認為至少需採樣150隻。但不要將這150PL一起萃取,因為大量的稀釋會產生偽陰性的結果;建議將這150PL分成5群,每群30隻且分別萃取DNA並分別跑PCR

有一些加壓篩選程序(challenge procedures),如採樣前以福馬林處理,被廣泛的應用在PL的採樣上。基本上,主要的概念是採樣時要選擇體型較小且較弱的動物。

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candy_blue.gif 在養成池要多久採樣一次?每次採樣要取多少隻蝦?

關於養成池的檢測次數並沒有任何硬性規定,一般而言,建議每兩星期檢測一次。但是只要養成池內有任何不尋常的徵兆發生時,就是要檢測的時候。

建議的最小採樣數目是5隻,可以將這5隻蝦採集腹()足後集中一起萃取DNA並一起跑PCR。如果要採10隻蝦,最好分成2群分別檢測。和PL一樣,應選擇體型較小、較弱且靠近池邊的動物。

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